近日，扬州大学兽医学院叶建强教授课题组传出喜讯，首创基于鸡肝细胞系悬浮培养技术的高效价禽腺病毒（I群，4型）灭活疫苗（JH株），获得国家三类新兽药注册证书，将为血清4型禽腺病毒病的有效防控提供强有力的武器。
血清4型禽腺病毒（FadV-4）是家禽心包积液-肝炎综合征（HHS）的病原体，2015年以来该病在我国鸡群暴发流行，已成为危害我国养殖业健康发展的重要家禽新发传染病，给国内家禽业造成了重大经济损失。针对该病的免疫防控关键技术研究已被纳入国家十四五重点研发项目“动物疫病综合防控关键技术研发与应用”重点专项。
此次新兽药证书的获得，可谓十年磨一剑。由扬大兽医学院与国药集团扬州威克生物工程有限公司等企业共同合作完成。这其中，叶建强教授带领下的扬大兽医学院学生科创团队更是表现不俗。
在叶建强团队中，动物医学专业大四学生郭艺文带领学生科创团队开展创新研究，获得了多项FAdV-4免疫防控新技术成果。他们首次创制了利用荧光标记重组病毒来检测FAdV-4中和抗体的高通量快捷新型技术，比传统技术缩短2～3天，为评估FAdV-4疫苗免疫效果提供了技术支撑。
学生科创团队通过CRISPR/Cas9技术，首次创制了基于双荧光高效筛选重组FAdV-4构建平台以及多个表达家禽重要病原保护性抗原的重组FAdV-4弱病毒，为研发以FAdV-4为载体的基因工程多价多联弱毒疫苗提供了技术与产品保障。其相关研究成果已在《Frontiers in Microbiology》（前沿微生物学）等期刊上发表，且申请了6项国家发明专利。
“传统的重组禽腺病毒基因工程疫苗构建方法，往往需要对病毒的全基因组进行克隆操作，过程繁琐、耗时费力。所以，我们一直在寻找提高重组禽腺病毒疫苗构建效率的办法。”科创团队成员徐贞琦介绍，通过查阅了大量资料后，他们发现CRISPR/Cas9系统作为一种新兴的基因编辑技术，在基因编辑中操作简单、靶向性好、编辑效率高，在重组病毒构建领域被广泛应用。
创制一种疫苗已经是不小的成果，构建一个平台则是实现了又一次跨越。叶建强告诉记者，通过靶向并编辑病毒毒力基因fiber-2，学生科创团队利用CRISPR/Cas9基因编辑以及Cre-LoxP重组等技术，创制了基于双荧光筛选的表达外源基因的重组血清4型禽腺病毒平台，该平台可高效快捷鉴别与纯化重组病毒，利用该平台构建了表达H9N2禽流感病毒以及鸡传染性贫血病病毒等多个重要家禽病毒保护性抗原的重组FAdV-4基因工程候选弱毒疫苗，为有效联防联控FAdV-4与其他重要家禽病毒疫病提供了技术支撑与产品保障。
“传统的灭活疫苗诱导体液免疫，而构建的重组基因工程弱毒疫苗能同时激发机体的体液免疫与细胞免疫，能提供更好的免疫效果。”叶建强称，与团队研发的高效禽腺病毒（I群，4型）灭活疫苗一样，创制的表达多个重要家禽病毒保护性抗原的重组禽腺病毒弱毒疫苗在不久的未来有望投入实际生产中，为家禽重要病毒疫病防控保驾护航。
（记者 章勇）
